Материалы и методы исследования
Лабораторные животные
В опытах были использовано 240 самок и 240 самцов мышей линии СВА в возрасте 2 мес. с массой тела 18-20 г. Мыши содержались по 10 животных в полипропиленовых клетках размером 30×21×9 см при режиме освещения 12:12 часов и температуре воздуха в помещении 22±2 оС. Животные получали полнорационный брикетированный корм и водопроводную воду без ограничений.
Мыши были разделены на 3 группы по 160 в каждой (одинаковое количество самцов и самок):
1 группа – интактные животные (контроль);
2 группа – животным в течение 6 месяцев добавляли в ежедневный рацион по 9 мг/мышь продукт спортивного питания «ВСАА 2:2:1» (группа сравнения);
3 группа – животным в течение 6 месяцев добавляли в ежедневный рацион по 9 мг/мышь продукт спортивного питания «BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN» (основная группа).
При расчете дозировок исходили из рекомендаций по применению спортивного питания ВСАА: 10 г на 1 порцию 3 раза в день – всего 30 г в день для человека среднего веса 70 кг, или 0,43 г/кг массы тела, или 9 мг на мышь.
Всех мышей ежемесячно взвешивали на электронных весах. В каждой группе находили среднее значение массы тела животных и ошибки среднего, наклон линейной регрессии нарастания массы тела с возрастом и его среднее значение по группам. Кроме того, мышей, начиная с 9-го месяца наблюдения, делили на классы: с низкой массой тела (до 29 г), со средней (от 29 г до 33 г) и с повышенной массой тела (больше 33 г). Определяли количество (в %) мышей с разной массой тела в каждой исследуемой группе на 9-й, 12-й и 15-й месяцы опыта.
Методика изучения мышечной силы и физической утомляемости мышей
Измерение мышечной силы и утомляемости проводилось через 6 месяцев после начала эксперимента. Мышей подвешивали на веревку, натянутую на высоте 75-80 см, так, чтобы они цеплялись передними лапами и висели на веревке до момента утомления и падения. Время, через которое мыши переставали цепляться за веревку и падали, фиксировали как время висения. Через 20 минут мышей подвешивали второй раз и снова измеряли время висения. Время выражали в секундах и находили среднее значение из двух показателей, высчитывали сумму, а также разницу между временем первого и второго висения, что могло служить показателем восстановления сил. Кроме того, учитывая вес подвешенных животных, вычисляли отношение массы мыши ко времени ее первого и второго висения и времени висения к массе животного. Из этих показателей также находили среднее значение, сумму и разницу. В группах подсчитывали те же показатели, но уже по классам в зависимости от массы тела животных.
Наблюдение за животными вели в течение 15 месяцев.
Статистическая обработка результатов исследования
При статистической обработке результатов исследования применяли методы вариационной статистики с использованием пакета статистических программ STATGRAPH. Рассчитывали параметры уравнения регрессии для кривых возрастной динамики веса тела. Достоверность различий оценивали по критериям t Стьюдента, точному методу Фишера, Х2, непараметрическому критерию Вилкоксона-Манна-Уитни [Гублер, 1978].
Результаты исследования влияния продуктов спортивного питания «BCAA 2:1:1 + PEPTIDE COMPLEX IPH-AEN»
1. Возрастная динамика массы тела животных
Средние значения массы тела животных в различном возрасте в подопытных и контрольной группах представлены в таблице 1. Можно видеть, что с возрастом масса тела мышей увеличивалась, и в возрасте 15 месяцев она превышала массу тела 6-месячных животных на 50% в контрольной группе, на 55% — в группе мышей, получавшей ВСАА, на 56% — в группе мышей, получавшей BCAA с пептидом IPH-AЕN (p<0,05 в группе сравнения и в основной группе по сравнению с контрольной группой). Мыши подопытных групп весили достоверно больше контрольных (p<0,05).
Таблица 1
Возрастная динамика массы тела мышей (в граммах), получавших в дневном рационе продукты спортивного питания: «ВСАА 2:1:1» и «BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN»
Группа животных | Возраст (месяцы) | ||||
2 | 6 | 9 | 12 | 15 | |
Контроль Интактные | 19,08+0,07 | 20,83+0,15 | 23,11+0,17 | 28,12+0,19 | 31,34+0,21 |
ВСАА 2:1:1
9 мг/мышь |
18,67+0,09 | 21,02+0,14 | 24,16+0,11* | 29,36+0,21* | 32,68+0,20* |
BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN
9 мг/мышь |
18,77+0,05 | 20,94+0,10 | 24,39+0,13* | 29,42+0,15* | 32,66+0,19* |
* р<0,05 — различие достоверно по сравнению с показателем в контрольной группе.
Следует отметить, что индивидуальная масса тела животных в группах весьма варьировала, и с возрастом число мышей, имевших массу тела, существенно меньшую или существенно большую средних показателей для группы, различалось.
Таблица 2
Распределение мышей по массе тела в группах, получавших в дневном рационе продукты спортивного питания «ВСАА 2:1:1» и «BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN»
Группа животных | Количество мышей в классах по массе тела (%) | ||
До 29 г | От 29 до 33 г | Больше 33 г | |
на 12-м месяце опыта | |||
Контроль Интактные | 30,2 | 59,1 | 10,8 |
«ВСАА 2:1:1»
9 мг/мышь |
19,1* | 63,7 | 17,2* |
«BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN»
9 мг/мышь |
14,9*^ | 63,2 | 21,9*^ |
на 15-м месяце опыта | |||
Контроль Интактные | 18,2 | 72,1 | 9,7 |
«ВСАА 2:1:1»
9 мг/мышь |
8,9* | 54,3* | 36,8* |
«BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN»
9 мг/мышь |
7,6*^ | 51,0* | 41,4*^ |
* р<0,05 — различие достоверно по сравнению с показателем в контрольной группе;
^ р<0,05 — различие достоверно по сравнению с показателем в группе мышей, получавшей ВСАА.
При разделении мышей каждой группы на три весовых класса: с низкой массой тела (менее 29 г), средней (с массой тела от 29 до 33 г) и повышенной (с массой тела 33 г и более) оказалось, что число мышей среднего веса в каждом возрасте достоверно не различается между группами (от 51 до 72%). В то же время, число мышей с низкой массой тела, получавших продукты спортивного питания, во всех трех группах было относительно меньшим, чем в контроле, а число мышей с повышенной массой тела — большим, чем в контрольной группе (табл. 2). Особенно существенно это различие проявилось на 15-м месяце опыта: доля животных со средней массой тела достоверно ниже в группах мышей, получавших продукты спортивного питания, чем у интактных животных (54,3% и 51,0% во 2 и 3 группах, соответственно, против 72,1% в контроле, р<0,05), а доля мышей с повышенной массой тела в группах, получавших спортивное питание, почти в 4 раза превышает долю мышей с повышенной массой тела в контрольной группе (36,8% и 41,4%, соответственно, во 2 и 3 группах против 9,7% в контрольной группе, р<0,05). Обращает на себя внимание достоверно большая доля мышей с повышенной массой тела среди животных, получавших ВСАА с пептидом, по сравнению с мышами, получавшими ВСАА без пептида (41,4% соответственно, в 3 группе против 36,8% в группе с ВСАА без пептида, р<0,05).
2.Влияние продуктов спортивного питания «ВСАА 2:1:1», «BCAA 2:1:1 + Peptidecomplex IPH-AЕN» на мышечную силу и физическую утомляемость мышей
Результаты исследования представлены в таблице 3.
При определении мышечной силы, утомляемости и способности к восстановлению сил установлено, что среди мышей с повышенной массой тела (больше 33 г), получавших продукты спортивного питания «BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN» (3 группа животных), время первого и второго подвешивания достоверно отличалось от соответствующего показателя в группе 2, животные которой получали ВСАА без пептидов. Так, животные 3 группы висели при первом подвешивании 142,39±13,43 с, при втором подвешивании — 155,16±17,54 с, что достоверно больше, чем у животных 2 группы, получавших ВСАА без пептидов – соответственно, при первом подвешивании 119,67±13,45 с, при втором подвешивании — 128,43±16,11 с (р<0,05). При этом интактные мыши с повышенной массой тела падали практически сразу после подвешивания – при первом подвешивании через 12,41±2,17 с, при втором – через 15,78±3,11 с,
У животных с низкой и средней массой тела 3 группы, получавших ВСАА с пептидами, время висения при первом и втором подвешиваниях имело тенденцию к увеличению по сравнению как с показателем у контрольных (интактных) животных, так и с показателем у животных 2 группы, получавших ВСАА без пептида, хотя различия не были достоверными в связи с большими индивидуальными колебаниями показателя у мышей.
Важным показателем является также разница между временем висения после второго и после первого подвешиваний, которая указывает на степень утомляемости и способности к восстановлению сил у животных. Так, у мышей с повышенной массой тела, получавших ВСАА с пептидом IPH-AeN (3 группа), разница между временем висения после первого и второго подвешивания составила 12,77±1,31 с, в то время как у мышей с повышенной массой тела, получавших ВСАА без пептидов, — 8,76±1,2 с (р<0,05), при этом у контрольных животных этот показатель составил всего 3,37±1,56 с (р<0,05 по отношению к показателям у мышей 2 и 3 групп).
Приведенные данные свидетельствуют о том, что повышенная масса тела значительной части животных 3 группы, получавших ВСАА с пептидами (41,4% на 15-м месяце наблюдения), обусловлена приростом мышечной массы, поскольку продукт спортивного питания «BCAA 2:1:1 + Peptide complex IPH-AЕN» увеличивал мышечную силу и снижал утомляемость мышей, способствуя быстрому восстановлению сил, в 1,46 раза больше, чем ВСАА без пептида, и в 3,8 раза больше по сравнению с контрольными животными, не получавшими спортивного питания.